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            Flow Cytometry

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            表面染色流程-TONBO

            試劑準備:

            • 流式染色緩沖液 (Flow Cytometry Staining Buffer) :產品編號TNB-4222-L500
            • 12x75 mm 圓底流式管或 96孔圓底微孔板

             

            染色流程:

            1. 制備單細胞懸浮液,用流式染色緩沖液調整濃度至2 x 10 7- 2  x 10 8 cells/mL。

            2. 每管(或孔)加50 µL 細胞懸浮液。

            3. 加推薦量的抗體到樣品里,細胞懸浮液+抗體的最終體積不應超過100µL。

            4. 4°C避光孵育20-­60分鐘。

            5. 用200­-300 µL (微孔板) 或 1­2 mL (管) 染色緩沖液洗細胞.

            6. 300-­400 x g室溫離心5分鐘,棄掉上清液。短暫渦旋重懸細胞。

            7. 如果不需要加二抗,直接調到第10步 。

            8. 如果二抗是純化抗體或生物素偶聯抗體,加100 µL 稀釋好的抗體到管里。

            9. 4°C避光孵育20-60分鐘。

            10. 300­-400 x g室溫離心5f分鐘,棄掉上清液。短暫渦旋重懸細胞。

            11. 每管加入適當的染色緩沖液重懸細胞,上機檢測或進行胞內染色。

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